“哎，這次細(xì)胞活率太差了吧！”

“怎么會這么少？是細(xì)胞計(jì)數(shù)儀不準(zhǔn)還是細(xì)胞被污染了？”

“媽呀，細(xì)胞融合度都接近100%了，趕緊凍掉?！?/i>

“天啊，凍存管爆管啦！細(xì)胞液濺的到處都是！

如果您解凍的細(xì)胞出現(xiàn)上述情況時(shí)，那就要格外注意了！

實(shí)際上，細(xì)胞的凍存與解凍是兩個(gè)關(guān)鍵的工藝過程，彼此間又是反向過程，它們直接決定了最終細(xì)胞樣本的活率及傳代的效果，關(guān)鍵是要把握好緩“凍”速“融”！

一、那么細(xì)胞如何凍? 怎么凍?

如果直接放到-80℃冰箱或者-196℃液氮里凍存的話，那么最終收獲的細(xì)胞幾乎“傷亡殆盡”說成”全軍覆沒“亦不為過。早期，細(xì)胞凍存前需要采用異丙醇程序降溫盒，因?yàn)槠湓?80℃冰箱中存放后，可以實(shí)現(xiàn)-1℃/分鐘的降溫速率，但是由于異丙醇存在刺激性氣味，長期使用存在泄露危險(xiǎn)，對人體健康危害頗多，該方法目前基本被淘汰。

另一種泡沫材質(zhì)的程序降溫盒，最早由美國Biocision公司開發(fā)，通過結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)及冷氣流通原理實(shí)現(xiàn)梯度降溫，但這也限制了降溫速率，不同劑量、不同配比、不同種類的細(xì)胞，尤其那些對溫度變化敏感的細(xì)胞，應(yīng)該采用不同的降溫曲線，隨著生命技術(shù)行業(yè)快速發(fā)展，程序降溫盒這種非智能化降溫工具正被高科技設(shè)備所替代。

細(xì)胞的梯度降溫應(yīng)采用可變溫控制的程序降溫儀，在符合GMP要求下，需要對降溫工藝數(shù)據(jù)曲線可以報(bào)告形式打印輸出，且可對批次記錄進(jìn)行后續(xù)的審計(jì)追蹤。

A. 通過控制氣相狀態(tài)液氮添加量來實(shí)現(xiàn)細(xì)胞樣本的梯度降溫，這一類相關(guān)設(shè)備在生物制藥行業(yè)普遍使用，可直接將樣本降到-130℃以下的深低溫條件。CBS 2101型程序降溫儀，就是采用這一原理對細(xì)胞樣本進(jìn)行梯度降溫。

通過集成的PC電腦端將降溫工藝參數(shù)輸入到配套的軟件中，內(nèi)置溫度傳感系統(tǒng)，軟件與硬件相結(jié)合控制著腔體內(nèi)的生物樣本降溫！30L的存儲空間，可以實(shí)現(xiàn)數(shù)百支凍存管樣本預(yù)冷效果，亦可以提供更大尺寸容量的降溫設(shè)備！